液相色譜儀的使用要滿(mǎn)足哪些要求？

　　液相色譜儀的系統由儲液器、泵、進(jìn)樣器、色譜柱、檢測器、記錄儀等幾部分組成。儲液器中的流動(dòng)相被高壓泵打入系統，樣品溶液經(jīng)進(jìn)樣器進(jìn)入流動(dòng)相，被流動(dòng)相載入色譜柱(固定相)內，由于樣品溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配系數，在兩相中做相對運動(dòng)時(shí)，經(jīng)過(guò)反復多次的吸附-解吸的分配過(guò)程，各組分在移動(dòng)速度上產(chǎn)生較大的差別，被分離成單個(gè)組分依次從柱內流出，通過(guò)檢測器時(shí)，樣品濃度被轉換成電信號傳送到記錄儀，數據以圖譜形式打印出來(lái)。

　　液相色譜儀的使用要求：

　　1、氣泡會(huì )致使壓力不穩，重現性差，所以在使用過(guò)程中要盡量避免產(chǎn)生氣泡。

　　2、如果進(jìn)液管內不進(jìn)液體時(shí)，要使用注射器吸液：通常在輸液前要進(jìn)行流動(dòng)相的清洗。

　　3、使用緩沖溶液時(shí)，做完樣品后應立即用去離子水沖洗管路及柱子一小時(shí)，然后用甲醇(或甲醇水溶液)沖洗40分鐘以上，以充分洗去離子。對于柱塞桿外部，做完樣品后也必須用去離子水沖洗20mL以上。

　　4、長(cháng)時(shí)間不用儀器，應該將柱子取下用堵頭封好保存，注意不能用純水保存柱子，而應該用有機相(如，甲醇等)，因為，純水易長(cháng)霉。

　　5、要注意柱子的pH值范圍，不得注射強酸強堿的樣品，特別是堿性樣品。

　　6、更換流動(dòng)相時(shí)應該先將吸濾頭部分放入燒杯中邊振動(dòng)邊靖洗，然后插入新的流動(dòng)相中。更換無(wú)互溶性的流動(dòng)相時(shí)要用異丙醇過(guò)渡一下。

　　7、流動(dòng)相必須用HPLC級的試劑，使用前過(guò)濾除去其中的顆粒性雜質(zhì)和其他物質(zhì)(使用0.45μm或更細的膜過(guò)濾)。

　　8、流動(dòng)相過(guò)濾后要用超聲波脫氣，脫氣后應該恢復到室溫后使用。

　　9、不能用純乙腈作為流動(dòng)相，這樣會(huì )使單向閥粘住而導致泵不進(jìn)液。

　　10、每次做完樣品后應該用溶解樣品的溶劑清洗進(jìn)樣器。

　　11、C18柱絕對不能進(jìn)蛋白樣品，血樣、生物樣品。

　　12、堵塞導致壓力太大，按預柱→混合器中的過(guò)濾器→管路過(guò)濾器→單向閥檢查并清洗，清洗方法：

　?。?）以異丙醇作溶劑沖洗；

　?。?）放在異丙醇中間用超聲波清洗；

　?。?）用10％稀硝酸清洗。