高效液相色譜從原理上與經(jīng)典的液相色譜沒(méi)有本質(zhì)的差別,它的特點(diǎn)是采用了高壓輸液泵、高靈敏度檢測器和高效微粒固定相,適于分析高沸點(diǎn)不易揮發(fā)、分子量大、不同極性的有機化合物。
使用高效液相色譜時(shí),液體待檢測物被注入色譜柱,通過(guò)壓力在固定相中移動(dòng),由于被測物種不同物質(zhì)與固定相的相互作用不同,不同的物質(zhì)順序離開(kāi)色譜柱,通過(guò)檢測器得到不同的峰信號,最后通過(guò)分析比對這些信號來(lái)判斷待測物所含有的物質(zhì)。高效液相色譜作為一種重要的分析方法,廣泛地應用于化學(xué)和生化分析中。
高效液相色譜跑梯度如何平衡基線(xiàn)?
首先,當梯度完成時(shí),基線(xiàn)漂移是正常的,但是基線(xiàn)漂移的嚴重性可以通過(guò)以下措施來(lái)改善:
1.梯度前,最好用純有機溶劑沖洗高效液相色譜柱,或使用新高效液相色譜柱,以防止高效液相色譜柱中的殘留物導致基線(xiàn)漂移。
2.試劑純度優(yōu)選為普通色譜純試劑。如果純度不夠,梯度過(guò)程中也會(huì )出現基線(xiàn)漂移。
3.控制室或柱溫,防止溫度波動(dòng)
4.注射前,進(jìn)行溶劑空白試驗。如果基線(xiàn)漂移嚴重,可使用該空白進(jìn)行扣除,基線(xiàn)漂移將得到改善。